原理:
本产品采用温和洗涤配方,可在不影响目的蛋白的情况下,去除结合在印迹膜上的一抗和二抗,使同一张膜可进行多次抗体检测,无需反复电泳和转膜,节省样品和时间,适用于使用NC或PVDF膜进行Western Blot检测时条件的优化或同一样品不同蛋白的检测。
保存条件:
2-8℃保存,一年有效。
操作步骤:
1、将曝光后的膜取出,加入适量的再生液(再生液充分覆盖膜表面,8.5 cm×5.5 cm膜加入15 ml左右再生液),室温振摇孵育15分钟左右(孵育时间应根据不同的目的蛋白来调整:比如内参抗体等表达量较高的蛋白,使用再生液时可以延长孵育时间至1小时或者在37℃孵育30分钟);
2、弃去再生液,用15 ml缓冲液(PBST或TBST)洗膜3次,每次5分钟,室温振摇;
3、为了检测酶标二抗洗脱是否完全,此时可以用显色方法来确定二抗是否洗脱掉;
4、待检测完毕,确认膜上无残留的酶活性,再生后的膜通过加入15 ml的封闭液进行封闭,室温30分钟或者4℃封闭过夜;
5、重新加入待测一抗,进行下一轮的WB实验。
注意事项:
1、建议先检测表达量较低的目的蛋白,用再生液处理后检测表达量高的蛋白,如内参蛋白等;
2、请佩戴手套操作。1、最快速的电泳操作: 一次性...
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